方法一:抗油脂過氧化力測定
脂類包括的范圍很廣,是構(gòu)成生物膜的主要成分,脂類中的不飽和脂肪酸可以過氧化,脂類過氧化過程中會產(chǎn)生L、LO、LOO-等自由基以及LOOH,這些產(chǎn)物會損傷生物細胞。因此,能夠抑制脂類過氧化具有重要的生物學意義。
A硫氰酸鐵法FTC:硫氰酸鐵鹽(FTC)的比色法基于酸性條件,由脂質(zhì)氧化形成的過氧化物可以將Fe2+氧化為Fe3+,F(xiàn)e3+和硫氰酸根離子可以在480-515nm內(nèi)最大吸收通常用500nm處吸光值的高低代表物質(zhì)抗脂質(zhì)過氧化能力,吸光值越小,代表物質(zhì)抗脂質(zhì)過氧化能力越強。
B硫代巴比妥酸反應物TBARs法:是評價油脂氧化程度的常用方法。油脂或亞油酸氧化后的最終產(chǎn)物主要是丙二醛,這些過氧化產(chǎn)物與硫代巴比妥酸作用生成有色化合物,該有色化合物吸收在530nm左右。
方法2:去除2、2苯代苦味陷阱DPPH能力的側(cè)定
DP是早期合成的有機自由基,常用于評價抗氧化物的供氫能力,在有機溶劑中非常穩(wěn)定,呈紫色,而且到處有特征吸收峰,遇到自由基清除劑時,DPPH的孤獨電子配對退色因此,通過測量吸光值的變化,可以評價樣品對DPPH自由基的清除效果
方法3:恢復能力的測定
恢復能力的測定是檢查樣品是否是良好的電子供應體的方法,恢復能力強的樣品應該是良好的電子供應商,其供應的電子不僅可以使Fe3+恢復為Fe2+,還可以與自由基反應。還原力的測定是評價抗氧化劑活性的常用方法。
方法四:抑制LOX酶實驗
脂肪氧化酶LOX在植物中分布廣泛是一種非血紅素鐵蛋白,分子量為90一100KD。這種酶蛋白有多個多膚鏈組成,含有三價鐵離子金屬輔基則有活性,而包含二價鐵離子的金屬輔基則缺乏活性。在生物體內(nèi)的主要作用是,專一催化含有順,順一戊二烯結(jié)構(gòu)的多元不飽和脂肪酸的加氧反應,生成具有共扼雙鍵的多元不飽和脂肪酸的氫過氧化物。生物體內(nèi)的主要玩具是甘油脂類(如磷脂)釋放的游離不飽和脂肪酸,其中動物體內(nèi)的主要玩具是花生四烯酸,植物體內(nèi)的主要玩具是亞油酸和亞麻酸,主要玩具是過氧羚羊型脂肪酸。
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